单细胞测序技术正在革命性地推动我们对生命复杂性的认知，然而其高昂的每样本成本和技术复杂性，限制了其在更多实验室和更广泛物种中的普及。尽管多重样本标记技术能有效“降本增效”，但现有的方法往往受限于免疫抗体植物物种特女性朋友、寡核苷酸遮盖利润昂扬或运作步骤复杂性。近日，南方海洋科学与工程广东实验室（广州）的陈凯教导微商团队在Journal of Genetics and Genomics上发表了一项创新性方法学研究，提出了一种名为HEATag的新型样本标记策略，为我们提供了一个成本低的低、跨植物物种、全网站兼容的全新解决方案。

刊物间介

Journal of Genetics and Genomics (JGG)是由国内科学实验课技术院基因基因隐性基因规律与健康发育怪物学研发所和国内基因基因隐性基因规律法学会主办者的國际学术讨论界杂志，坚持创新驱动于新闻人的一生科学实验课技术和临床医学基因基因隐性基因规律学科技行业的创作者性研发科研成果。JGG 202多年度引响指数公式7.1，Scopus学术讨论界杂志评定招生指标CiteScore 9.9，位居JCR 202多年度GENETICS & HEREDITY科技行业Q1区(Top 10%)，BIOCHEMISTRY & MOLECULAR BIOLOGY科技行业Q1区，位居国内科学实验课技术院杂志区别怪物学种类别1区(Top杂志)，基因基因隐性基因规律学和生化学与氧分子怪物学小类双1区。

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哪些是HEATag

正确的“二三合一”设计方案

HEATag是由凝集素和HUH内切酶组合而成的构建球蛋白

「定位系统器」版块 - 凝集素

能够识别细胞膜上广泛存在且高度保守的糖基化修饰语（如GlcNAc和Neu5Ac）。

「连结器」模块图片 - HUH内切酶

可以序列特异性地与普通的、无需化学修饰的单链DNA（ssDNA）引索长商品条码实现共价联系。

“1+1>2”的体验：将两者融合，得到的HEATag蛋白既能通过凝集素牢牢锚定在细胞膜上，又能通过HUH蛋白携带特定的DNA条形码进行范本箭头与追溯。

Fig1: HEATag众多标上远离图示图

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实践检检

HEATag知乎问答有可以打？

可以在有差异 前提条件下，推动辅乳期家禽血细胞系系单血细胞系混样测序

实验室里的设计再精妙，也要经过真实样本的 “实战考验” 才算数。的研究技术团队为 HEATag 制定了多轮 “学习压力试验”，从肿瘤细胞膜系到肿瘤细胞膜核，从温度到温度，从新鲜范例到调整范例，全方向确认它的稳固性和耐用性。

首要轮试验面对母乳喂养各种动物肿瘤上皮上皮细胞系：调查人数选用了位于人、鼠、仓鼠3个外来鱼类的几种肿瘤上皮上皮细胞（HEK293T、K562、MEF、CHO），在高温下要 HEATag 标识后混合型喂养测序。进而利用的 11447 个肿瘤上皮上皮细胞中，85.66% 都能完成 HEATag 方形码精准的识别到原外来鱼类，模板间交叠环境污染特少，UMAP 聚类分析一下分析一下体现了直观材料，HEATag 方形码与外来鱼类特异形染色体组的特点高强度不一。 立刻，测试方法情况进一个步骤版本升级：探索人数成功在 4℃下标出鲜新血受损人体肿瘤内部、在高温下标出甲醇固定好不动血受损人体肿瘤内部，也能直接标出血受损人体肿瘤内部结构。最终可是即使真视：全部情况下，样版标注与种群图片信息均具备很好的的涉及到性，转换确切率超 95%。虽然甲醇固定好不动会影响经微的转录本是交叉水污染，血受损人体肿瘤内部结构提纯也有几瓶 RNA 浪费，血受损人体肿瘤内部类形的注音最终可是即使与鲜新样版稳定一样，事实证明 HEATag 能标出差异外理情况下的进行实验样版。

Fig2: HEATag 可在与众不同经济条件下顺利完成单细胞系转录组混样研究

都可以标注乳期植物和浮游生物无脊椎骨植物的原代神经元

但虽然細胞系各种测试是 “理论知识题”，那结构样例正是 “增加题”， 这么多样例并非因細胞的类型僵化、坏境适用性特出，称为箭头系统的 “瓶颈问题”，而 HEATag 恰恰恰在这么多 “瓶颈问题” 上体现了优越。

研究团队选择了大鼠和小鼠的睾丸集体，这类样本包含精原干细胞、精母细胞、精子细胞等多种类型，对标记一致性的要求极高。实验中，两种动物的睾丸用特异性 HEATag 条形码标记后混合测序，最终获得的 14663 个细胞这不仅能被为准辩别，每个重点受损细胞类型、的聚类算法没想到都清新可辨。

更令人惊喜的是HEATag对海洋资源菌物的更换性。HEATag能在海水的等渗溶液中标记新鲜的海洋动物细胞（如海月水母、大西洋海刺水母）。研究人员用人工海水稀释的HEATag 标记了水母和珊瑚的组织细胞后在 BD Rhapsody 平台测序，最终回收的 6452 个细胞中，HEATag 长条码与鱼类转录组含有较高不对性，还没有存在因高盐大环境导至的 “标签没用”。后续对甲醇固定的海洋生物细胞测试结果显示，HEATag 在固定样本中的拆分效果优于新鲜样本。

Fig3: HEATag 可达成母乳喂养两栖动物聚集模板诸多 scRNA-seq 定性分析

Fig4: HEATag可构建鲜新海洋资源无脊椎骨节肢动物几吨 scRNA-seq 数据分析

HEATag与神经细胞的联系不是出现转录组的可观该变

对样本标记技术来说，“不影响样本本身的 RNA 特征” 是底线。研究团队将来自同一供体的等量的 HEATag 标记细胞与未标记细胞混合测序，对比两者的 RNA 质量、基因捕获数量和细胞组成。结果显示，标记组与未标记组的 RNA 质量没有明显差异，捕获的基因数量基本持平，UMAP 图谱显示两组样本的细胞组成高度相似，转录相似性更是维持在高位。无论是细胞簇的注释结果，还是不同细胞类型的基因回收数量，两组都几乎一致，没有出现 “标记导致的基因表达异常”。这意味着，HEATag在搞定标上任务卡的同一，不懂对后期的转录多组分析导致的干忧，提高了研究探讨数据资料的真實性。

Fig5: HEATag不易作用范本的 RNA 传达模式英文

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末来可期

HEATag 能为单组织研究分析面临之类？

HEATag 的实用价值，远不尽于 “应对标注毛病”，它的具备灵生物高性和共通性，正当为单细胞系设计打开文档其他应该性

从应该用场所来了解

HEATag 能扩大从 “简单的相对探析”（如癌组识开展业务与正常值组识开展业务、肿瘤药物治理与相较比较）到 “大投资额探析”（如组识开展业务上皮癌细胞图谱制作、高通骁龙量的需求）的全比率的需求。由于 PIP-seq、Stereo-cell 等复合型可突出新技术的经济发展，HEATag 还能进那步发展单上皮癌细胞探析的通量，电子助力科技创新精英团队开展业务较大投资额的建设项目。

从跨业务领域优势来谈

HEATag 不单单常用以转录组学，还能与表观遗传基因组学、核核苷酸组学、三维空间组学等技艺整合，顺利通过定制网站指数和寡核苷酸字段，HEATag 也也可以高效日常化有差异的组学工艺流程，不会影响4g信号捕捉到层次。还，体系结构HEATag还也也可以进展单内部糖组学科学研究技艺。

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合伙动图

拜谱怪物与陈凯讲解完成率基本达成合作意愿

可以青睐的是，在 HEATag 技能显流露出不小使用前景的题材下，拜谱生物技术制品水平已与中国南方海上调查与工程项目湖南省调查室（苏州）陈凯传授完成最初媒体项目合作意向但这并。夫妻双方规划重点围绕 HEATag 技能的品牌化趴地、教育科研项目课题转化率等方位生成高度协同业务，力促这一项高效率益费用、跨动物群的单血内部核标签技能较快使用于现场教育科研项目课题3d场景，为更好调查室可以提供高效率、条件的单血内部核学习平台，注力教育科研项目课题业务者在血内部核生物技术制品水平学、海上生物技术制品水平学、常见疾病系统等邻域获得更好进阶